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簡(jiǎn)述豬瘟檢測(cè)中窗口期的確認(rèn)方法
豬瘟病毒的附著力到底有多強(qiáng)?直接接觸或者攜帶病毒的物品再次傳播的能力有多強(qiáng)?尚不清晰。目前已知豬瘟是高度接觸性傳播的急性,主要通過(guò)接觸或采食受豬瘟病毒污染的物品,以及通過(guò)昆蟲(chóng)吸血而傳染。短距離可經(jīng)空氣傳播、污染的飼料、泔水、剩菜及肉屑、欄舍、車輛、器具和衣服等均可間接傳播本病。今天我們主要介紹豬瘟檢測(cè)中窗口期的確認(rèn)方法。
確認(rèn)豬只是否處于窗口期的方法很多,但當(dāng)前成熟的方法還是定性或定量的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法。
檢測(cè)樣本的選擇 根據(jù)研究數(shù)據(jù),口拭子、鼻拭子都可以作為窗口期的檢測(cè)樣本,但是新鮮分泌的唾液往往具有較大的檢測(cè)優(yōu)點(diǎn),其病毒含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于口拭子和鼻拭子。新鮮分泌的唾液中非洲豬瘟病毒值比口鼻拭子中的非洲豬瘟值平均低5左右。
唾液樣本處理 處于窗口期的豬只,尚具備較強(qiáng)的特異性免疫能力和非特異性免疫能力,機(jī)體對(duì)病毒的清理作用較強(qiáng),兩者處于對(duì)抗?fàn)顟B(tài),主要是唾液中的酶(溶菌酶、核酸酶、堿性磷酸酶等)活性較高,收集到唾液中的非洲豬瘟病毒如果含量過(guò)低,病毒很快將被唾液降解。因此,采集的唾液要進(jìn)行核酸保護(hù)。
唾液樣本檢測(cè) 由于處于窗口期內(nèi)唾液樣本中非洲豬瘟病毒含量較低,對(duì)檢測(cè)條件的要求較為苛刻。建議對(duì)檢測(cè)環(huán)境(溫度、空氣、水、操作臺(tái)面)、檢測(cè)試劑套裝、檢測(cè)儀器進(jìn)行比對(duì)和考核,慎重選擇。為了取得好的唾液樣本,采樣之前需要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行禁食處理(12小時(shí))。
研究證實(shí),試管唾液中的病毒在靜置或離心狀態(tài)下,底部的非洲豬瘟病毒含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于試管上清中的病毒含量,所以建議從試管底部取樣進(jìn)行檢測(cè)。
實(shí)施實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作之前,建議對(duì)操作人員進(jìn)行科學(xué)采樣和取樣培訓(xùn),培訓(xùn)合格后才允許從事檢測(cè)工作。
確認(rèn)豬只是否處于窗口期的方法很多,但當(dāng)前成熟的方法還是定性或定量的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法。
檢測(cè)樣本的選擇 根據(jù)研究數(shù)據(jù),口拭子、鼻拭子都可以作為窗口期的檢測(cè)樣本,但是新鮮分泌的唾液往往具有較大的檢測(cè)優(yōu)點(diǎn),其病毒含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于口拭子和鼻拭子。新鮮分泌的唾液中非洲豬瘟病毒值比口鼻拭子中的非洲豬瘟值平均低5左右。
唾液樣本處理 處于窗口期的豬只,尚具備較強(qiáng)的特異性免疫能力和非特異性免疫能力,機(jī)體對(duì)病毒的清理作用較強(qiáng),兩者處于對(duì)抗?fàn)顟B(tài),主要是唾液中的酶(溶菌酶、核酸酶、堿性磷酸酶等)活性較高,收集到唾液中的非洲豬瘟病毒如果含量過(guò)低,病毒很快將被唾液降解。因此,采集的唾液要進(jìn)行核酸保護(hù)。
唾液樣本檢測(cè) 由于處于窗口期內(nèi)唾液樣本中非洲豬瘟病毒含量較低,對(duì)檢測(cè)條件的要求較為苛刻。建議對(duì)檢測(cè)環(huán)境(溫度、空氣、水、操作臺(tái)面)、檢測(cè)試劑套裝、檢測(cè)儀器進(jìn)行比對(duì)和考核,慎重選擇。為了取得好的唾液樣本,采樣之前需要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行禁食處理(12小時(shí))。
研究證實(shí),試管唾液中的病毒在靜置或離心狀態(tài)下,底部的非洲豬瘟病毒含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于試管上清中的病毒含量,所以建議從試管底部取樣進(jìn)行檢測(cè)。
實(shí)施實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作之前,建議對(duì)操作人員進(jìn)行科學(xué)采樣和取樣培訓(xùn),培訓(xùn)合格后才允許從事檢測(cè)工作。